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Lumiprobe/艾美捷――抗体标记试剂盒丨Lumiprobe公司

放大字体 缩小字体 发布日期:2022-01-20 11:19:46 来源:互联网

 Lumiprobe抗体标记试剂盒用于制备每个抗体具有2.5-3个标签的标记抗体。试剂盒包含用于10个标记反应的所有试剂和材料,每个反应100 ug抗体。染料是一种NHS酯,过量服用。在弱碱性pH下,它与抗体的赖氨酸胺基反应。抗体的纯化通过使用旋转柱的凝胶过滤实现。这些试剂盒含有磺化水溶性染料,适合标记敏感蛋白质,包括抗体。

 

Lumiprobe

Lumiprobe 专业提供分子生物学研究用的活性荧光染料。覆盖领域有:活性染料(ReactiveDye)和SYBRGreen I染料,定制合成荧光双标记引物。主要应用:点击化学(CLickChemistry)、蛋白质组学研究中的双向荧光差异凝胶电泳(2DDIGE)和实时荧光定量PCR(ReaLtimePCR)。

 

接下来给大家介绍一下Lumiprobe /艾美捷 抗体标记试剂盒的相关内容:

 

1.抗体制备

标记反应的佳条件如下:浓度为1 mg/mL的抗体溶解在0.1 M碳酸氢钠溶液中。叠氮化钠与标签相容。如果抗体浓度低于1 mg/mL,则应进行浓缩。抗体制备应不含氨基酸、蛋白质(如BSA)和缓冲成分,这些成分会使pH值处于不利(2-7.5或9-12)范围。

 

2.建立反应

2.1. 向荧光团、旋涡中添加碳酸氢钠抗体溶液(100微克/100微升*),并在室温下培养30分钟。

*如果要标记少量抗体,将冻干染料溶解在10微升无水二甲基亚砜中,每10微克抗体取1微升溶液。应立即消耗DMSO中的染料溶液。

 

3.标记抗体的纯化

3.1. 准备专栏。使用前,色谱柱应在室温下。应使用漩涡重新悬浮凝胶。将色谱柱放入废物容器(无盖),并在1000 g下离心2分钟(必须小心控制速度-对于标准6 cm转子,1000 g=3800 rpm)。立柱的小凸起应朝外。

3.2. 应用400微升1x PBS缓冲液,以1000 g离心2分钟。

3.3. 从废物容器上拆下柱。将其放入收集管(带盖)。将100微升反应混合物施加到柱上,培养1分钟,并通过离心以1000 g的速度洗脱抗体2分钟。添加1/100体积的100倍叠氮化钠。抗体可以等分以提高其保存期。当前等分试样可储存在+4°С的温度下,其余等分试样可储存在+4°С的温度下−20 °С.

 

4.染料与抗体比率的测量

为了计算染料与抗体的比率,测量共轭物的吸收光谱,或在280 nm(AAB)和染料吸收大值(ADye)处的吸收。染料标记抗体的典型吸收光谱如下所示。根据染料的不同,大波长可能会有所不同。

 

Lumiprobe 部分研究工具:

cat# 名称 规格

11030 Cy3 azide 100ul

12030 Cy3.5 azide 100ul

13030 Cy5 azide 100ul

14030 Cy5.5 azide 100ul

14130 FAM azide,5-isomer, 100ul

11130 JOE azide,5-isomer 100ul

14230 R110 azide,5-isomer 100ul

12230 ROX azide,6-isomer 100ul

17130 TAMRA azide, 5-isomer 100ul

33720 Azidobutyric acid NHS ester 100ul

 

艾美捷科技是Lumiprobe 的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。

 
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